产品货号:
BTN130804
中文名称:
单细胞裂解液(RNA)
英文名称:
Single Cell Lysis Buffer For RNA
产品规格:
1mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是单细胞RNA提取专用裂解液,产品经过多次优化,含有多种去污剂、变性剂和盐,可有效抑制核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏,维持核酸的稳定性。单细胞裂解物可以直接用于测序和RT-PCR等试验。
组分 | 规格 |
单细胞裂解液(RNA) | 1mL |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,有效期1年。
本制品足够使用200次以上,一次可以处理1~1000个细胞。
如何制备单个细胞取决于实验样品和实验者所拥有的仪器设备,此处所列步骤仅针对培养细胞、实体组织、淋巴细胞和卵裂球(2~8细胞胚胎)等材料,对其他材料(如干细胞克隆、胚囊、胚胎组织等),用户需自行选用合适的方法制备单细胞。对已经处于单细胞悬浮状态的细胞(如FACS分离细胞、卵细胞等),则可以跳过制备过程而直接进入单细胞裂解步骤。
按下面手册,本制品1次可以处理1~1000个细胞。下面的步骤是以制备单个细胞/裂解反应为例,如果要制备N个细胞/裂解反应的悬浮液,浓度需要相应调整。
一、用培养细胞或实体组织制备单细胞
- 按常规胰酶方法处理培养细胞或组织(一般是用PBS洗涤两次,再用0.25% Trypsin-EDTA处理2分钟),将细胞重悬于自备的液体细胞培养基中。
- 按常规方法对细胞进行计数。
- 转移100~4000个细胞到新离心管中,400g离心4分钟沉淀细胞,小心弃上清(培养基)。
- 将细胞沉淀重悬于50μL自备的PBS溶液中,使其终浓度为2~80个细胞/μL。
- 在干净的培养皿上点加数个含5μL PBS溶液的小液滴,也可以在96孔板或0.2mL PCR管中进行。
- 在第一个小液滴中加入5μL细胞悬浮液,然后再从第一个小液滴中转移5μL到第二个小液滴,如此系列稀释样品数次,使得其浓度接近每2.5μL液体含1个细胞,放冰上待用。
二、用单细胞裂解液裂解细胞
- 在显微镜下用显微注射仪取2.5μL样品,确认含一个细胞后,将其转移到一个含2.5μL本制品的PCR管中。最好同时设置无样品的阴性对照(2.5μL样品中不含细胞)。
- 细胞将在5分钟内裂解。
- 裂解液可以立即用于后续实验(如PCR或RT-PCR),也可以放冰上数小时待用。如果长期不用,需要放-80℃保存。使用时从-80℃中取出后,放冰上融化后即可使用。
相关搜索:单细胞裂解液(RNA),单细胞裂解液,Single Cell Lysis Buffer For RNA